雖然細胞培養(yǎng)物污染不能*消除,因為微生物是我們的恒定伴侶,可以實施精細控制的過程以減少發(fā)作的影響。良好的無菌技術,清潔的實驗室和對污染途徑的了解,包括進入二氧化碳培養(yǎng)箱本身是至關重要的。在這里喆圖小編帶大家看看二氧化碳培養(yǎng)箱的使用及其在提供安全環(huán)境中的作用,沒有任何潛在的污染微生物。
細胞培養(yǎng)依賴于使用培養(yǎng)箱來維持保持細胞存活的正確條件。二氧化碳專門用于模擬哺乳動物的生理條件。因此,培養(yǎng)箱將細胞所需的元件結合:37℃(98.6°F)的穩(wěn)定溫度,7.6的受控pH,與受控的CO 2水平和95%的高相對濕度平衡。不幸的是,哺乳動物細胞的理想環(huán)境也為我們身體內(nèi)和身上的正常菌群的一系列生物污染物提供了理想的環(huán)境。這就是為什么理解良好的實驗室實踐以及如何選擇合適的設備可以幫助減少污染是如此重要。某些二氧化碳培養(yǎng)箱,例如:
正確:良好的實驗室規(guī)范
良好的實驗室操作是防止污染的有效的方法。穿著一件帶有彈性袖帶的實驗室外套,覆蓋街頭衣服,在開始任何細胞工作和戴一次性手套之前*洗手,工人可以大大降低潛在的污染。盡可能多地,文化主義者還應避免接觸門把手,電話,計算器等物品; 并綁回長長的頭發(fā)。任何患有感冒或其他呼吸道感染的人應做好防護措施,以盡量減少感染的潛在傳播。
冰箱,冷凍箱,儲物柜和長凳的工作區(qū)域和頂部應保持清潔,整潔,無灰塵。地板應定期清潔,特別是角落,以減少灰塵和污垢,由于交通在房間里的流通。此外,應清潔實驗室設備(例如,機械移液器,渦流,水浴,離心機),并定期檢查污染跡象。沒有適當?shù)臒o菌技術的替代品。文化和媒體應只在生物安全柜中打開,不應由人員共享。常見的污染途徑是當培養(yǎng)基液滴保留在培養(yǎng)容器和其蓋子之間或培養(yǎng)基瓶的頸部上時形成的液體“橋”進入。
二氧化碳培養(yǎng)箱作為培養(yǎng)細胞的家,是保持良好實驗室操作的重點。記住,哺乳動物細胞的環(huán)境也是微生物伴侶的誘人環(huán)境。由于任何培養(yǎng)箱污染物的進入路徑是通過敞開的門,需要建立一個將門開口保持小的工作系統(tǒng)。嘗試限制共享培養(yǎng)箱的人數(shù),以減少污染源。設置標準和定期清潔程序(每周或每月),并立即使用70%酒精清除任何溢出物。
培養(yǎng)箱設計:保持污染檢查
二氧化碳培養(yǎng)箱的設計可以是減少生物制劑污染的重要因素。有許多有用的功能,簡化清潔,并提供持續(xù)保護,防止日常使用中的污染。這些能力區(qū)分培養(yǎng)箱的選擇,重要的是認識到不同制造商的類似選項不一定提供相同的結果。
容易清洗
當孵育器易于清潔并且具有小的內(nèi)表面時,可以顯著地控制微生物的存在。具有圓角的培養(yǎng)箱消除了裂縫和邊緣,微生物可以隱藏和繁榮。電拋光的表面去除微小的凹陷,否則這些微小的凹陷將用作細菌的隱藏孔。
清潔培養(yǎng)箱時有幾個好的規(guī)則:
從培養(yǎng)箱中取出所有的培養(yǎng)基,并關閉。
取出培養(yǎng)箱的所有獨立內(nèi)部組件,并使用肥皂消毒劑清潔它們。
在高壓滅菌器中消毒所有可移動部件。
*清潔所有內(nèi)表面,然后對所有表面涂抹消毒劑,并使其干燥。任何剩余的殘余物可以使用蒸餾水除去。
用70%的酒精擦拭所有表面,讓它們風干。
使用70%的酒精消毒培養(yǎng)箱的外部門和手柄。
如果存在水盤,向水中添加安全的抗微生物劑是一個好主意。在平底鍋中使用蒸餾水,每周更換一次。在整個清潔過程中一定要戴手套和實驗室外套,以盡量減少引入新的污染生物體。
高溫消毒
在一些培養(yǎng)箱上可用的方便的選擇是自動化高干熱或濕熱消毒循環(huán)。大多數(shù)這些設計為用空培養(yǎng)箱運行過夜。高熱消毒提供了一個有效的方法,以確保培養(yǎng)箱的內(nèi)部沒有細菌,當你的細胞進入培養(yǎng)箱在一個清潔周期后。
雖然消毒循環(huán)不能消除對常規(guī)清潔培養(yǎng)箱的需要,但它可以消除對單獨高壓滅菌內(nèi)部部件的需要,并消除“駐留”污染的風險。
空氣過濾
一些二氧化碳培養(yǎng)箱上的一個常見功能是HEPA過濾器,其將過濾內(nèi)部空氣,去除微生物,微粒,氣溶膠,在一些情況下,揮發(fā)性有機化學品。100級HEPA過濾器應能快速提供潔凈室空氣質(zhì)量,以便消除通過門進入的任何污染物。
考慮在開門之后獲得大空氣質(zhì)量所需的時間,特別是如果頻繁的門開啟是不可避免的。此恢復時間可能因制造商而異。4 HEPA過濾器需要少量維護,但應定期更換(即每六個月)以獲得效果。
一些二氧化碳培養(yǎng)箱提供了銅內(nèi)部的選擇以抑制當門打開時可能進入培養(yǎng)箱的任何細菌的生長。如上所述,只有100%的純銅將在幾分鐘內(nèi)有效地消除微生物污染物。固體銅中的Cu 2+離子不會變成空氣傳播,因此培養(yǎng)皿和燒瓶中的培養(yǎng)物沒有風險。這是在細胞培養(yǎng)培養(yǎng)箱中具有連續(xù)抗微生物保護的偉大方式,其將持續(xù)培養(yǎng)箱的壽命,同時需要維護。
防護外部環(huán)境
大多數(shù)培養(yǎng)箱都有一個固體玻璃內(nèi)門,以保護樣品免于意外暴露于外部環(huán)境。分開的氣密內(nèi)門將進一步有助于小化在門打開之后的暴露和速度恢復設定條件。這個分開的內(nèi)門可以提供三個或六個單獨的較小的門,其允許進入培養(yǎng)箱的特定部分而不干擾其他區(qū)域。分隔的內(nèi)門減少了微生物進入培養(yǎng)箱的任何機會,并使來自培養(yǎng)箱的熱,大氣和濕度的損失小化。
外部水源
生命需要水,當然包括微生物。雖然他們喜歡在二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖,潮濕的氣氛,水盤是特別邀請。通常將抗菌化合物,銅線硬幣加到水盤中。具有應用或特別有價值的樣品的實驗室也可以考慮將加濕器水源移動到培養(yǎng)箱外部的培養(yǎng)箱設計,從而*從培養(yǎng)箱內(nèi)部去除這種污染源。
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